Экскреция соединения VMA-99-82 – нового производного аденина, обладающего противовирусной активностью
Пн, 30 Нояб -0001
1702

Резюме

При изучении экскреции препарата установлено, что VMA-99-82 определяется в моче в течение не менее 72 ч исследования. Почечный клиренс составляет 0,936 мл/ч, внепочечный – 666,04 мл/ч при внутривенном пути введения; 1,8 мл/ч и 1009,72 мл/ч соответственно при пероральном пути введения. Превосходство внеренального клиренса над ренальным коррелирует с полученными ранее данными о характере распределения соединения  VMA-99-82 в органы и ткани. Препарат определялся в почках в невысоких концентрациях и при внутривенном и при пероральном путях введения. Тканевая доступность составила 0,452 и 0,413 при внутривенном и пероральном путях введения соответственно. Доля элиминации неизменённой субстанции от введённой дозы составляет менее 1%, причём в кале её количество примерно в 5 раз ниже, чем в моче. В связи с этим можно предположить интенсивное протекание процессов биотрансформации.

Ключевые слова: производные аденина, экскреция

Введение

На процессы изменения концентраций лекарственных препаратов, их взаимодействие и метаболизм, т.е. освобождение организма от любых ксенобиотиков, огромное значение оказывают процессы биотрансформации и экскреции. Иначе говоря, эффективность и безопасность любого лекарственного средства во многом обусловлена процессами биотрансформации и выведения, которое осуществляется различными путями. Соответственно, изучение процессов экскреции является важным и обязательным этапом исследования любого  биологически активного вещества, предлагаемого к использованию в качестве лекарственного средства [1, 2].

Из ряда 9-производных аденина, синтезированных на кафедре фармацевтической и токсикологической химии ВолгГМУ в результате скрининговых исследований было выбрано вещество лидер по противовирусной активности – соединение VMA-99-82 (адепрофен). Данное соединение продемонстрировало высокую ингибиторную активность в отношении различных ДНК- и РНК-содержащих вирусов, в частности цитомегаловируса человека и ВИЧ-1 [3-5].

Таким образом, целью данной работы явилось изучение процессов экскреции нового производного аденина – соединения VMA-99-82.

Методы исследования

Эксперименты выполнены на 50 белых беспородных крысах-самцах массой 180-220 г, которые содержались в условиях вивария на стандартной диете с соблюдением всех правил и Международных рекомендаций Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых при экспериментальных исследованиях. Содержание изучаемого соединения определяли в моче и кале. Сбор проб мочи и кала осуществляли в метаболических камерах «Термопласт» (Италия).

Соединение  VMA-99-82 вводили крысам внутривенно и перорально в высшей терапевтической дозе 50 мг/кг. Сбор проб мочи и кала осуществлялся в течение 3 суток каждые 24 ч. Сбор проб в контрольной группе животных проводился в течение 24 ч [6].

Для количественного определения соединения  VMA-99-82 был использован метод ВЭЖХ, жидкостной хроматограф (Shimadzu, Япония). Определение проводили при помощи диодноматричного ультрафиолетового детектора, длина волны 205 нм. Хроматографическое разделение осуществлялось на колонке SUPELCOSIL LC-18 (5 мкм; 150 мм×4,6мм). Время удерживания составило около 7,0-7,5 мин. Чувствительность метода – 1 мкг/мл, средняя ошибка измерения не превышает 10%.

Статистическую обработку результатов проводили при помощи компьютерной программы Microsoft Excel [7].

Результаты исследования

При изучении экскреции препарата было выявлено, что VMA-99-82 определяется в моче при внутривенном пути введения в течение не менее 72 ч исследования. При этом максимум выведения приходится на 2 сутки после введения (рис. 1). С мочой выделилось менее 1% неизмененной субстанции от общего количества введенного препарата. Почечный клиренс составляет 0,936 мл/ч, внепочечный – 666,04 мл/ч, то есть значительно превышает ренальный.

При исследовании экскреции VMA-99-82 с содержимым кишечника было обнаружено, что максимальное выделение препарата приходится на 2 сутки исследования (рис. 1). Соединение определяется не менее 72 ч. Суммарная экскреция неизменённой субстанции в 5 раз ниже таковой в моче, что свидетельствует о низкой степени участия данного пути выведения в процессах элиминации препарата в организме крыс.

Рис. 1. Содержание препарата VMA-99-82 в моче и кале крыс при внутривенном введении в дозе 50 мг/кг

После перорального введения крысам VMA-99-82 определяется в моче в течение не менее 72 ч исследования. При этом максимум выведения приходится на 1 сутки после введения (рис. 2). Почечный клиренс составляет 1,8 мл/ч, внепочечный – 1009,72 мл/ч.

При исследовании экскреции VMA-99-82 с содержимым кишечника было обнаружено, что максимальное выделение препарата также приходится на 1 сутки исследования (рис. 2). Соединение определяется в течение 48 ч.

Картина экскреции несколько отличается от таковой при внутривенном пути введения, и основная часть выведения происходит в первые сутки исследования, но количество неизменённой субстанции, выделяемой с мочой и калом также крайне незначительно (менее 1%).

При пероральном введении крысам было установлено, что VMA-99-82 быстро всасывается из желудочно-кишечного тракта, максимум концентрации достигается через 30 мин после введения.

Рис. 2. Содержание препарата VMA-99-82 в моче и кале крыс при пероральном введении в дозе 50 мг/кг

Установленное в результате проведённых исследований значительное превосходство внеренального клиренса над ренальным коррелирует с полученными ранее данными о характере распределения соединения VMA-99-82 в органы и ткани. Препарат определялся в почках в низких концентрациях и при внутривенном и при пероральном путях введения. Тканевая доступность составила 0,452 и 0,413 при внутривенном и пероральном путях введения соответственно.

Длительное время определения изучаемого соединения в экскретах соотносится с установленными ранее данными о длительной циркуляции в крови и высоких значениях периода полувыведения (11 и 6,5 ч для внутривенного и перорального пути введения, соответственно).

Низкие значения элиминации неизменённой субстанции с мочой и калом могут свидетельствовать о выраженной способности вещества подвергаться процессам биотрансформации в организме и о высоком значении эффекта «первого прохождения через печень».

Работа была выполнена в рамках государственного контракта № 11411.1008700.13.077 с Минпромторгом России.

Литература

1. Белоусов. Ю.Б. Клиническая фармакокинетика, Москва, Литтерра. 2005.

2. Каркищенко Н.Н., Хоронько В.В., Сергеева С.А., Каркищенко В.Н. Фармакокинетика, Ростов-на-Дону, Феникс. 2001.

3. Петров В.И., Озеров А.А., Новиков М.С.и др. Фундаментальные исследования. 2004. № 1. С. 78-79

4. Петров В.И., Озеров А.А., Новиков М.С. и др. Вестник Волгоградского государственного медицинского университета, 2004. № 11. С. 21-24

5. Petrov V.I., Ozerov A.A., Novikov M.S.. 39 (9). . 1218-1226.

6. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. // Р.У. Хабриев (ред.), Москва. 2005.

7. Дерфель К. Статистика в аналитической химии. Москва, Мир. 1994.

 

Похожие статьи